1、而現(xiàn)在的PCR儀一般均配備熱蓋，熱蓋溫度可設(shè)為105°C， 反應(yīng)時(shí)熱蓋與樣品管緊密接觸， 使樣品管頂部的溫度也達(dá)到105°C 左右，反應(yīng)液就不會(huì)產(chǎn)生蒸發(fā)，這樣就無(wú)需再向反應(yīng)管內(nèi)加石蠟油。
1、開(kāi)機(jī)順序：先開(kāi)電腦，待電腦完全啟動(dòng)后再開(kāi)啟定量PCR儀主機(jī)，等主機(jī)面板 上的綠燈亮后即可打開(kāi)定量PCR的收集軟件，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。關(guān)機(jī)順序：確認(rèn)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)結(jié)束后，首先關(guān)閉信號(hào)收集軟件，然后關(guān)掉定量PCR儀主機(jī)的電源，最后關(guān)閉電腦。
2、方法：將DNA加熱（至90~95℃）變性，將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板。則是令Primers于一定的溫度下（冷卻至55~60℃）附著于模板DNA兩端。
3、⑦在燈艙門(mén)處于打開(kāi)狀態(tài)下，打開(kāi)儀器，確證在儀器運(yùn)行時(shí)燈也能打開(kāi)。 ⑧蓋上燈罩，擰緊螺絲，關(guān)上燈艙門(mén)。 ⑨若新鹵素?zé)舨还ぷ?，GeneAmp 7000電源保險(xiǎn)絲可能有問(wèn)題。
4、注意移液器正確使用，吸取或排出微量液體時(shí)，應(yīng)注意保證吸取或加入量的準(zhǔn)確性。 加完所有試劑后去氣泡應(yīng)徹底。 及時(shí)記錄儀器使用及狀況。 瓊脂糖膠濃度可根據(jù)目的條帶大小做適當(dāng)調(diào)整。
5、．打開(kāi)電源，機(jī)器自檢。2．按C鍵，屏幕出現(xiàn)Program No。3．按數(shù)字鍵輸入程序號(hào)。4．按→，然后按A鍵，通過(guò)上、下、左、右箭頭選擇所需字 母，按D鍵確定程序名稱(chēng)。此步可省。5．按↓，輸入熱蓋溫度，按D鍵確認(rèn)。
6、．常規(guī)程序 將PCR反應(yīng)所需的成分配置完后，在PCR儀上于94-96℃預(yù)加熱幾十秒至幾分鐘，使模板DNA充分變性，然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。
1、區(qū)別：對(duì)未知序列進(jìn)行測(cè)序，可以通過(guò)PCR把整段基因都擴(kuò)增出來(lái)，但是因?yàn)楝F(xiàn)在測(cè)序的技術(shù)限制，DNA片段兩端的序列是測(cè)不出來(lái)的，直接PCR產(chǎn)物測(cè)序的結(jié)果只能獲得基因中間部分序列。
2、PCR全稱(chēng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)；體內(nèi)基因擴(kuò)增指體內(nèi)正常的基因復(fù)制，比如在細(xì)胞分裂間期的染色體復(fù)制復(fù)制就有體內(nèi)基因擴(kuò)增；基因復(fù)制是指具體的基因擴(kuò)增的方式，DNA復(fù)制是一種半保留復(fù)制。
3、PCR技術(shù)是模擬體內(nèi)DNA的天然復(fù)制過(guò)程，在體外擴(kuò)增DNA分子的一種分子生物學(xué)技術(shù)，主要用于擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段。
4、PCR技術(shù)也就是基因擴(kuò)增技術(shù)，它是通過(guò)基因擴(kuò)增儀，在細(xì)胞外進(jìn)行DNA復(fù)制，由1個(gè)DNA分子增加到2個(gè)，然后依次增加到4個(gè)，8個(gè)…，使分子數(shù)目呈幾何級(jí)數(shù)增加，以在短時(shí)間內(nèi)獲得足夠的DNA，供研究用的一種技術(shù)。
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