通過(guò)用已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)聚合物建立一條保留時(shí)間和相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)應(yīng)關(guān)系的“校正曲線”,即可從GPC譜圖中計(jì)算出測(cè)試樣品的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量的分布信息。凝膠滲透色譜儀的組成與操作 凝膠滲透色譜儀的組成如圖1所示,主要包括泵系統(tǒng)、自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)、凝膠色譜柱、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)采集與處理系統(tǒng)。
凝膠過(guò)濾層析中線性和球狀的區(qū)別是不同的溶質(zhì)因不同程度進(jìn)入介質(zhì)而在液相中停留的時(shí)間不同,凝膠的孔徑和溶質(zhì)分子不同。
凝膠過(guò)濾層析,又稱凝膠過(guò)濾色譜(GFC)或粒徑排除色譜法(SEC),是一種常用的蛋白質(zhì)純化技術(shù),根據(jù)其流體動(dòng)力學(xué)體積或大小的差異分離大分子。原理 凝膠過(guò)濾層析的一般原理相當(dāng)簡(jiǎn)單,它利用惰性凝膠介質(zhì)作為分離基質(zhì),該介質(zhì)由具有穩(wěn)定物理性質(zhì)的球狀珠子組成多孔結(jié)構(gòu)。
凝膠過(guò)濾法是一種用于分離不同大小分子的層析技術(shù)。該方法也可稱為凝膠滲透、凝膠排阻、尺寸排阻和分子篩層析法。其基本原理是分子在流動(dòng)相和固定相之間分離,固定相是由相對(duì)尺寸的多孔基質(zhì)組成。微粒通常呈球狀,具有兩個(gè)可測(cè)量的液體體積:外水體積(V0)和內(nèi)水體積(Vt)。
依據(jù)流動(dòng)相中使用的溶劑類型,它也被稱為分子排異、分分子篩、凝膠滲透和凝膠排異色譜法。與離子交換色譜和親和色譜不同,GFC的特征在于蛋白質(zhì)分子和溶劑之間沒(méi)有相互作用,如流動(dòng)相。這使得這種方法在緩沖液的選擇上相當(dāng)靈活,由于它對(duì)于柱子的分辨率沒(méi)有任何不利的影響。
此外,凝膠滲透層析也可用于蛋白質(zhì)的分離提純,但其應(yīng)用范圍相對(duì)凝膠過(guò)濾層析較窄。綜上所述,凝膠層析作為一種重要的生化分離和純化技術(shù),其類型主要包括凝膠過(guò)濾層析和凝膠滲透層析。這兩種類型在原理和應(yīng)用上有所差異,但都是基于試樣分子的尺寸和形狀不同來(lái)實(shí)現(xiàn)分離的。
層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì),多是交聯(lián)的聚糖(如葡聚糖或瓊脂糖)類物質(zhì),小分子物質(zhì)能進(jìn)入其內(nèi)部,流下時(shí)路程較長(zhǎng),而大分子物質(zhì)卻被排除在外部,下來(lái)的路程短,當(dāng)一混合溶液通過(guò)凝膠過(guò)濾層析柱時(shí),溶液中的物質(zhì)就按不同分子量篩分開了。
使用儀器測(cè)試。根據(jù)查詢化工儀器網(wǎng)顯示。將凝膠樣品置于儀器的測(cè)試杯上,啟動(dòng)儀器測(cè)試樣品,測(cè)得下壓這一用力過(guò)程中大的壓力值(峰值)下,為凝膠強(qiáng)度的測(cè)定出油率。凝膠:又稱凍膠。溶膠或溶液中的膠體粒子和高分子在一定條件下互相連接,形成空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),結(jié)構(gòu)空隙中充滿了作為分散介質(zhì)的液體,在干凝膠中也可以是氣體,干凝膠也稱為氣凝膠,一種特殊的分散體系稱作凝膠。
出油率:CX-3425的出油率不及9212的1/3,CX-3425表現(xiàn)更勝一籌?;貜椥裕?212和CX-3425兩者在150°溫度下壓縮30%,時(shí)間3小時(shí),兩者制成的導(dǎo)熱硅膠墊片10分鐘后均可回彈性95%,兩者表現(xiàn)不相上下。
凝膠穩(wěn)定性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)涉及多個(gè)方面,主要包括凝膠材料的穩(wěn)定性、水凝膠載藥的穩(wěn)定性以及藥用凝膠的穩(wěn)定性測(cè)試。 凝膠材料的穩(wěn)定性:主要考察凝膠在長(zhǎng)時(shí)間放置或受到外界干擾時(shí),能否保持其結(jié)構(gòu)和性能的穩(wěn)定。這通常通過(guò)觀察凝膠的形態(tài)和質(zhì)量變化來(lái)評(píng)估,如是否出現(xiàn)分層、變色等現(xiàn)象。穩(wěn)定性越好的凝膠,使用壽命越長(zhǎng)。
對(duì)于實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性,在0.1%至5%之間的濃度范圍內(nèi)進(jìn)行測(cè)試最為合適。
在試驗(yàn)期間第1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月末分別取樣一次,按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目檢測(cè)。在上述條件下,如6個(gè)月內(nèi)供試品經(jīng)檢測(cè)不符合制訂的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),則應(yīng)在中間條件下即在溫度30℃±2℃,相對(duì)濕度65%±5%的情況下進(jìn)行加速試驗(yàn),時(shí)間仍為6個(gè)月。
外用藥物ACM凝膠檢測(cè)步驟: - 對(duì)ACM凝膠進(jìn)行外觀檢查,確認(rèn)其包裝完好、無(wú)破損,凝膠質(zhì)地均勻、無(wú)異物。 - 取適量凝膠進(jìn)行pH值測(cè)定,確保其在規(guī)定范圍內(nèi)。 - 進(jìn)行微生物限度檢查,確保凝膠中無(wú)致病菌污染。 - 對(duì)凝膠中的有效成分進(jìn)行含量測(cè)定,確保含量符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。
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